土壤淀粉酶（Soil Amylase，S-AL）試劑盒說明書

發(fā)布時(shí)間：2023/9/21

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微量法100T/48S

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義：

淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一類酶的總稱。土壤中的淀粉酶主要來自于微生物，是一種重要的酶制劑，廣泛應(yīng)用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)。

測(cè)定原理：

淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖，可與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì)，在508nm處有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與還原糖量成正比。

需自備的儀器和用品：

天平、水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、甲苯。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體4mL×1瓶，4℃保存。若出現(xiàn)沉淀析出，需70℃加熱溶解后再用。

試劑三：液體12mL×1瓶，4℃保存。

測(cè)定操作表：

	對(duì)照管	測(cè)定管
土樣（g）	0.02	0.02
甲苯（μL）	10	10
25℃靜置15min
試劑一（μL）	110	50
試劑二（μL）		60
充分混勻，37℃震蕩1h，8000rpm，25℃，離心10min
上清液（μL）	100	100
試劑三（μL）	100	100
充分混勻，90℃水浴5min，待冷卻后，于微量石英比色皿/96孔板中測(cè)定508nm吸光值，分別記為A對(duì)照管和A測(cè)定管，△A=A測(cè)定管-A對(duì)照管。