水樣中六價(jià)鉻離子（Cr⁶⁺）濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

                                                     微量法100T/96S

注    意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義：

Cr⁶⁺主要來(lái)自電鍍、冶煉、表面處理工業(yè)等排放的污水和廢氣。通過(guò)消化道、呼吸道、皮膚及粘膜Cr⁶⁺進(jìn)入人體，造成傷害，甚至引起遺傳變異而致癌。

測(cè)定原理：

在酸性環(huán)境中，Cr⁶⁺與二苯碳酰二肼作用生成紫紅色絡(luò)合物，在540nm有特征光吸收。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、丙酮和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體1.1mL×1管，室溫保存。

試劑二：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1.4 mL丙酮充分溶解，顏色變深后不能再用。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1管，60 nmol/mL Cr⁶⁺，室溫保存。

水樣中六價(jià)鉻離子檢測(cè)：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到540nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 標(biāo)準(zhǔn)管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL標(biāo)準(zhǔn)液，180μL蒸餾水，混勻；加10μL試劑一，10μL試劑二，充分混勻；室溫下靜置10min，于540nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

3. 水樣測(cè)定：

（1）無(wú)色水樣直接測(cè)定：取微量石英比色皿/96孔板，加入200μL無(wú)色水樣，10μL試劑一，充分混勻；再加入10μL試劑二，充分混勻；室溫下放置10min。于540nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。

（2）有色水樣：取微量石英比色皿/96孔板，加入200μL水樣，10μL試劑一，蓋緊混勻后置于沸水浴中2min，退色；冷卻后加10μL試劑二，充分混勻；室溫下放置10min。于540 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

六價(jià)鉻離子濃度計(jì)算：

C_Cr⁶⁺(μmol/L)= C標(biāo)準(zhǔn)管÷標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù)×(A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管) ×V總

=6000×(A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管)

C標(biāo)準(zhǔn)：60nmol/mL=60 μmol/L；標(biāo)準(zhǔn)液稀釋倍數(shù)：（20 μL標(biāo)準(zhǔn)液+180μL蒸餾水）÷20 μL標(biāo)準(zhǔn)液=10； V總：1L=1000 mL

注意事項(xiàng)：

1. 水樣中鐵約50倍于六價(jià)鉻時(shí)，產(chǎn)生黃色，干擾測(cè)定，不宜用本試劑盒進(jìn)行測(cè)定；10倍于鉻的釩可產(chǎn)生干擾，但顯色20min后釩與試劑所顯色全部消失；200mg/L以上的鉬與汞有干擾；

2. 六價(jià)鉻離子為重金屬有毒離子，測(cè)定過(guò)程中應(yīng)注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到。

3. Z低檢出限為1mmol/L。